2.1 MEDIOS DE CULTIVOS

2.1 MEDIOS DE CULTIVOS

Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el desarrollo de  organismos y microorganismos. Una vez que ha sido preparado, un medio de cultivo puede ser inoculado (es decir, se le añaden organismos) y a continuación incubado en condiciones que favorezcan el crecimiento. El crecimiento de los organismos y microorganismos es el cultivo.

Los medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y deben estar exentos de cualquier microorganismo contaminante. Los medios de cultivo contienen como mínimo: carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias inductoras del crecimiento. También se añaden colorantes que actúan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras.

2.1.1 AREAS DEL LABORATORIO DE TEJIDOS DE CULTIVOS

El laboratorio de tejidos de cultivos debe disponer de un área destinada al establecimiento, crecimiento y multiplicación de las plantas producidas; esta área es especialmente necesaria en os laboratorios de investigación y desarrollo y en los de producción comercial.

Las áreas principales del laboratorio de cultivos de tejidos son:

ü Área de preparación

Se utiliza principalmente para preparar los medios de cultivos, consta de un espacio para almacenar los materiales  de vidrio y de plástico, y los reactivos químicos, consta de mesas de trabajo para preparar los medios, incluyen vitrinas y espacios para el equipo de refrigeración.

ü Área de lavado y esterilización

Debe incluir un lavadero grande con agua caliente, agua fría y una fuente de pureza. Se debe de usar un destilador de vidrio o de material no toxico y de un desionizador de agua colocado. El área de esterilización debe de tener espacio para el autoclave vertical u horizontal, el cual puede ser pequeño o grande, según sea el volumen del material que se procese.

ü Área de transferencia

En esta área se realiza la excisión, inoculación y transferencia de los explantes a los medios de cultivos, se recomienda la instalación de gabinetes de flujo horizontal o vertical de aire filtrado bajo presión o la construcción de cuartos de transferencia. Esta área debe estar ubicada en un lugar del laboratorio libre de corriente de corriente de aire y polvo.

ü Área de incubación

Esta área debe proporcionar un buen control de la temperatura (20-28°C), de iluminación y de la humedad relativa (70%-80%). En el cuarto de incubación se instalan estanterías metálicas o de maderas para colocar los cultivos. Debe incluir un espacio para cultivos en agitación y para cultivos estáticos en oscuridad, propiciar aire para evitar zonas de recalentamiento por efecto de las luces.

ü Área de observación y examen

En esta área se realizan observaciones periódicas de los cultivos, tanto en medios semisólidos como en líquidos.

ü Área de crecimiento

Las plantas que se regeneran en el área de incubación se pueden acondicionar o aclimatar y luego trasplantar en macetas, bandejas o camas apropiadas. Después del trasplante, las plantas generalmente necesitan un acondicionamiento gradual a las condiciones de campo, lo cual se puede lograr usando nebulización, cámaras húmedas, etc.